酵母PAP1与PHO85激酶复合物对YLR190w的磷酸化

• 作者: 敖世洲 石晓钟
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: PAP1 PHO85 YLR190w 磷酸化 酵母双杂交系统
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 187-192
• 页数: 6页
• 分类号: Q5
• 语种: 英文

摘要

酵母基因Pho85编码一个依赖于细胞周期蛋白(cyclin)的蛋白激酶(CDK), 参与多种调控途径. PHO85功能的多效性归于其相关的细胞周期因子, 现已经鉴定了10个与PHO85相关的细胞周期因子(PCL). 为了筛选PAP1-PHO85激酶复合物的特异底物, 以PAP1为靶分子, 利用酵母双杂交(two-hybrid)系统从酵母cDNA文库中克隆到一个与PAP1相互作用的蛋白质因子的基因, Ylr190w. Ylr190w编码491个氨基酸的多肽链. 体外翻译的YLR190w与纯化的融合蛋白GST-PAP1可以被谷胱甘肽亲和柱共同吸附, 这表明PAP1与YLR190w 在体外也可以结合. 用免疫沉淀获得的PAP1-PHO85复合物可以磷酸化在大肠杆菌中表达GST-YLR190w; 并受到无机磷浓度影响: 高磷条件时磷酸化程度高, 低磷条件时磷酸化程度低. 它能与酵母细胞内YAF9结合, YAF9 是人具有转录调控活性蛋白质因子AF9的酵母同源物. YLR190w与YAF9的相互作用受到磷条件影响, 突变YLR190w蛋白S/TP位点的S和T后, 它们的相互作用明显减弱, 且不再受到磷条件影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	敖世洲	中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室	10	53	2.0	7.0
2	石晓钟	中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室	2	0	0.0	0.0