干扰素γ增强GH<em>3</em>细胞中人生长激素基因表达机制

• 作者: 史轶蘩 邓洁英 龚凤英
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 干扰素γ 生长激素基因启动子 GH3细胞 荧光素酶报告基因
• 年，卷（期）: 2002,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 619-624
• 页数: 6页
• 分类号: Q5
• 语种: 英文

摘要

为了研究干扰素γ(IFN-γ)对大鼠垂体GH3 细胞中人生长激素(hGH)基因启动子活性的影响及其可能的作用机制, 采用荧光素酶报告基因方法, 将含hGH基因启动子(-484～2 bp)和荧光素酶报告基因的表达质粒pGL3-484-Luc单独转染或与垂体特异性核转录因子Pit-1蛋白表达质粒(pcDNA-Pit-1-cDNA)或Pit-1反义寡核苷酸(Pit-1 OND)共转染于大鼠垂体GH3细胞中, 观察加入IFN-γ及细胞内信号转导途径的抑制剂后GH3细胞中荧光素酶表达的变化, 反映其对hGH启动子活性的影响; 将含不同长度hGH基因启动子序列的荧光素酶表达质粒pGL3-380-Luc(-380～2 bp)、 pGL3-250-Luc(-250～2 bp)、 pGL3-132-Luc(-132～2 bp)和pGL3-66-Luc(-66～2 bp)分别转染GH3细胞, 观察它们对IFN-γ的反应, 以寻找IFN-γ影响hGH基因启动子活性的关键序列. 结果表明, IFN-γ (105 u/L, 106 u/L)均能促进大鼠垂体GH3细胞中荧光素酶的表达, 最高达对照组的131%(P<0.001); 在胞内信号转导抑制剂中, 只有丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导途径抑制剂PD98059(40 μmol/L), 能完全阻断 IFN-γ的促进作用; Pit-1蛋白过表达和表达被抑制对IFN-γ的促进作用没有影响; 含不同长度hGH基因启动子序列质粒中, 只有pGL3-380-Luc和pGL3-250-Luc仍具有对IFN-γ的反应性. 这说明IFN-γ能增强大鼠垂体GH3细胞中hGH基因的启动子的活性, 此作用可能是通过激活细胞内依赖MAPK的途径完成的, 并与hGH基因上游-250～-132 bp启动子序列密切相关, 但与垂体特异性核转录因子Pit-1蛋白关系不大.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	史轶蘩	中国医学科学院协和医院内分泌科	16	138	5.0	11.0
2	邓洁英	中国医学科学院协和医院内分泌科	13	130	5.0	11.0
3	龚凤英	中国医学科学院协和医院内分泌科	11	26	3.0	4.0