RD-PCR技术在酵母基因表达谱研究中的应用

• 作者: 刘莉扬 宋艳斌 张宝 郑文岭 马文丽
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: RD-PCR 酿酒酵母 EST
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 246-248,261
• 页数: 4页
• 分类号: Q75
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2002.03.011

摘要

目的应用RD-PCR技术分离酵母基因.方法首先提取酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)总RNA,纯化mRNA;然后,反转录成双链cDNA;再用限制性内切酶Sau3AI酶切,在酶切片段上加上接头后,用通用引物U进行第一次PCR扩增,以这一产物为模板用选择性引物(在通用引物的3'端延伸两个碱基)作第二次PCR扩增.5%PAGE胶分离基因片段,选择单带割胶回收,做第三次PCR扩增,与载体连接,最后进行测序分析.结果采用这种方法分离得到的基因片段,经Blast检索分析,确为来自酿酒酵母基因的cDNA片段或表达序列标签(EST).结论 RD-PCR技术可以有效地分离EST,可用于酵母基因表达调控的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马文丽	第一军医大学分子生物学研究所	136	1135	16.0	27.0
2	宋艳斌	第一军医大学分子生物学研究所	26	194	6.0	13.0
3	张宝	第一军医大学分子生物学研究所	40	211	9.0	11.0
4	郑文岭	广州军区总医院分子肿瘤生物研究所	200	1451	18.0	26.0
5	刘莉扬	西安交通大学分子生物学教研室	4	15	3.0	3.0