表达鸡Ⅱ型干扰素基因的重组鸡痘病毒的构建

• 作者: 刘秀梵 吴艳涛 彭大新 程坚
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡Ⅱ型干扰素 重组鸡痘病毒 表达
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 152-155
• 页数: 4页
• 分类号: S85
• 字数: 3534字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2002.02.012

摘要

以插入鸡Ⅱ型干扰素(IFN-Ⅱ)cDNA序列的重组质粒AIFN为模板,根据鸡痘病毒早晚期启动子PE/L的序列设计上游引物,鸡IFN-Ⅱ基因的cDNA 3'端序列设计下游引物,采用PCR法扩增包括启动子PE/L和鸡IFN-Ⅱ全长cDNA序列的基因片段.将该扩增片段定向插入鸡痘病毒转移载体1175中,获重组转移载体1175IFN,用以转染已感染鸡痘病毒282E4疫苗株(wt-FPV)的鸡(Gallus gallus)胚成纤维细胞(CEF).1175IFN与wt-FPV基因组DNA之间的同源重组产生了表达IFN-Ⅱ的重组鸡痘病毒rFPV-IFN-Ⅱ.通过在含X-gal的营养琼脂上连续挑选蓝色病毒蚀斑获得并纯化rFPV-IFN-Ⅱ.以细胞病变抑制实验证实,rFPV-IFN-Ⅱ感染的CEF表达了具有抗水泡性口炎病毒(VSV)活性的鸡IFN-Ⅱ.rFPV-/FN-Ⅱ(M.O.I＝0.01)感染CEF 72 h后,培养上清中IFN-Ⅱ的表达量为1 280 U/mL.动物实验表明,rFPV-IFN-Ⅱ接种雏鸡7 d或14 d后,其在体内表达的IFN-Ⅱ可显著减轻载体鸡痘病毒对1日龄SPF雏鸡体重增长的抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴艳涛	扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室	105	1064	18.0	27.0
2	刘秀梵	扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室	373	3732	28.0	39.0
3	彭大新	扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室	133	1222	21.0	28.0
4	程坚	扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室	12	397	10.0	12.0