表达鸡Ⅱ型干扰素重组鸡痘病毒的构建及其特性分析

• 作者: 刘胜旺 孙永科 智海东 王云峰 王玫 童光志
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡IFN-Ⅱ基因 重组鸡痘病毒
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 81-85
• 页数: 5页
• 分类号: S8
• 字数: 4281字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2005.01.016

摘要

将鸡Ⅱ型干扰素(ChIFNγ)基因插入到鸡痘病毒转移载体pSY681中,获得重组转移载体pSY681-ChIFNγ.将pSY681-ChlFNγ转染已感染亲本鸡痘病毒S-FPV-017株的鸡胚成纤维细胞,使其在鸡胚成纤维细胞内与鸡痘病毒基因组发生同源重组,产生表达ChIFNγ的重组鸡痘病毒rFPV-ChIFNγ.在含有X-gal的营养琼脂培养基上进行蓝斑筛选,通过PCR和间接免疫荧光等实验证实获得纯化的、表达ChIFNγ的重组鸡痘病毒.将在鸡胚成纤维细胞中培养72 h的rFPV-ChIFNγ上清接种小鼠成纤维细胞(L929),通过细胞病变抑制实验证明重组ChIFNγ具有抑制水疱性口炎病毒复制的活性,培养上清的抗病毒效价为2048 U/mL.