鸡α干扰素的原核表达及纯化

• 作者: 冯赛祥 吴斯宇 孙超 崔进 廖明 曲楠楠 焦培荣 王念晨 黄健妮
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 鸡α干扰素 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 29-31
• 页数: 3页
• 分类号: S816.75
• 语种: 中文

摘要

根据大肠杆菌密码子的偏好性对GenBank中发表的鸡α干扰素基因序列进行了密码子优化,全基因合成了鸡α干扰素基因片段486 bp.构建原核表达质粒pET-23b-ChIFN-α.将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,表达产物主要以包涵体形式存在,包涵体进行变性、复性和镍柱亲和纯化.表达产物经SDS-PAGE、Western-Blot分析表明,ChIFN-α蛋白得到了高效表达,其蛋白分子质量约19 kD,经镍柱亲和纯化后获得了高纯度的重组鸡α干扰索蛋白,其含量为0.82 mg/mL.本研究为鸡α干扰素的生物学活性分析和临床产品研发奠定了基础.