猪干扰素-γcDNA的克隆和原核表达

• 作者: 侯小康 韩柱
• 来源期刊: 齐鲁药事
• 学科: 工学
• 关键词: 猪干扰素γ RT-PCR 原核表达载体
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 药物研究
• 页码范围: 240-242
• 页数: 3页
• 分类号: TQ460.38
• 字数: 2130字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-7738.2008.04.022

摘要

目的 克隆猪的干扰素-γcDNA,并进行原核表达,以实现猪干扰素-γ的大量生产.方法 收集转染细胞(CHO-PCI-neo-PoIFNγ),用UNIQ-10柱式Trizol总RNA抽提试剂盒提取总RNA,并通过RT-PCR的方法扩增获得猪干扰素-γcDNA基因.将获得的猪干扰素-γcDNA基因克隆入原核表达载体pBV220中,组装成原核表达载体pBV220-cPoIFNγ.将这个表达载体转化入大肠杆菌表达菌株DH5α和BL21中,温度诱导培养后,进行SDS-PAGE实验检测.结果 特异表达带约在17KD的位置,并证实在菌株DH5α和BL21中的表达量没有明显的差异,其表达量都约占细菌总蛋白的15%.结论 成功地进行了猪的干扰素-γcDNA,并进行原核表达,为猪干扰素-γ的大量生产提供了可能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩柱		7	25	2.0	5.0
2	侯小康		5	17	1.0	4.0