小鼠IL-18 cDNA克隆及在H22肝癌细胞中的初步表达

• 作者: 周虎 裴冬生 赵惠仁 陆梁
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 白细胞介素-18 逆转录病毒载体 克隆
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 221-224
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2810字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8861.2002.03.018

摘要

目的构建小鼠白细胞介素-18(mIL-18)逆转录病毒载体,实现mIL-18在小鼠H22肝癌细胞中表达.方法用RT-PCR方法从小鼠肝脏细胞中扩增出mIL-18 cDNA,克隆到载体pBluscript中,测序后亚克隆到逆转录病毒载体pLNCX中.pLNCX/mIL-18重组子用脂质体介导的方法转染PA317包装细胞,用400μg/mL G418进行筛选.挑取筛选得到的阳性克隆扩大培养,取上清感染NIH3T3细胞和H22肝癌细胞.用感染后的H22细胞上清诱导小鼠脾细胞IFN-γ生成能力来检测H22细胞分泌mIL-18的情况.结果用NIH3T3细胞测得病毒滴度为1.5×105克隆形成单位CFU/mL,转染后的H22肝癌细胞上清对小鼠脾细胞具有显著的IFN-γ诱生作用.结论pLNCX/mIL-18重组子构建成功,初步证明转染后的H22肝癌细胞能够表达IL-18.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	裴冬生	徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心	68	201	8.0	10.0
2	陆梁	徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心	9	91	3.0	9.0
3	赵惠仁	徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心	14	67	4.0	8.0
4	周虎	徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心	4	5	1.0	2.0