二氢叶酸还原酶和谷氨酰胺合成酶双基因筛选扩增系统对外源基因表达的影响

• 作者: 张玉倩 楚雍烈 王志云 王秀平 田淑芳 阮力 魏博
• 来源期刊: 中华实验和临床病毒学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 四氢叶酸脱氢酶 谷氨酰胺合成酶 基因扩增 甲氨喋呤
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 59-61
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2688字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2002.01.016

摘要

目的研究二氢叶酸还原酶(DHFR,D)与谷氨酰胺合成酶(GS,G)单基因和二氢叶酸还原酶与谷氨酰胺合成酶(DHFR+GS,DG)双基因筛选扩增系统对外源基因表达的影响.方法选择N端部分TPO基因(T184)作为靶基因,以DHFR和GS基因作为筛选及扩增基因构建重组质粒pDCT184与pGCT184,将两种质粒分别转染CHO dhfr-细胞形成单基因筛选扩增系统,两种质粒共转染CHO dhfr-细胞形成双基因筛选扩增系统.在双基因筛选扩增系统中设计三种药物加压方式.第一种为DG方式:先用DHFR系统压力(MTX)筛选,再用GS系统压力(MSX)筛选;第二种为GD方式:先用GS系统压力筛选(MSX),再用DHFR系统压力筛选(MTX);第三种为共加压方式:同时利用DHFR与GS系统压力筛选(MTX+MSX).通过比较T184基因拷贝数及表达水平来研究DHFR和GS双基因筛选扩增系统对外源基因表达的影响.结果 T184基因拷贝数及表达水平在DG双基因筛选扩增系统不同药物加压方式中,均比DHFR或GS单基因筛选扩增系统高,但不同药物选择方式没有明显差异.结论采用DHFR+GS双基因筛选扩增系统共加压方式是提高CHO dhfr-细胞表达外源基因的有效途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阮力	中国预防医学科学院病毒学研究所	17	121	7.0	10.0
2	魏博	中国预防医学科学院病毒学研究所	2	16	2.0	2.0
3	田淑芳	中国预防医学科学院病毒学研究所	4	7	2.0	2.0
4	张玉倩		1	2	1.0	1.0