中国莱姆病螺旋体PD91外膜蛋白A的克隆表达及免疫保护性的初步研究

• 作者: 万康林 郝琴
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 伯氏疏螺旋体 外膜蛋白A 基因克隆表达 体外中和试验
• 年，卷（期）: 2002,（5）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 489-492
• 页数: 4页
• 分类号: R37
• 字数: 3701字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2002.05.007

摘要

目的克隆并表达中国莱姆病螺旋体Borrelia garinii基因型代表菌株PD91的外膜蛋白A(OspA),并对其免疫保护性进行初步研究,为进一步研制莱姆病疫苗提供基础. 方法用聚合酶链反应(PCR)从莱姆病螺旋体PD91全基因组DNA中将OspA基因调出,插入原核表达载体P42,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,表达产物用SDS-PAGE、Western blot分析,并进行基因序列测定.用重组OspA(rOspA)免疫新西兰家兔,用间接免疫荧光(IFA)检测其血清特异性抗体(IgG),并进行体外中和试验,从而对其免疫保护性有初步的了解. 结果 rOspA在宿主菌内表达高效、稳定;Western blot显示其与抗OspA的多抗有较好的免疫反应性;用rOspA免疫新西兰家兔后,其血清抗体(IgG)效价显著升高(32倍),体外中和试验表明,每毫升兔抗rOspA血清可杀灭105个莱姆病螺旋体. 结论在国内首次成功地对中国莱姆病螺旋体Borrelia garinii基因型的OspA基因进行了克隆和表达.rOspA有较好的免疫保护性,可作为多价莱姆病疫苗的一种成分.