生物传感器对抗戊型肝炎病毒单克隆抗体部分特性的研究

• 作者: 何志强 夏宁邵 张军 朱子恒 李少伟 李益民 葛胜祥 顾颖 鲜阳凌
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 生物传感器 戊型肝炎病毒 ORF2 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2002,（6）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 617-620
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3950字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2002.06.033

摘要

目的应用生物传感器对新制备的抗戊型肝炎病毒单克隆抗体(mAb)的亲和力、Ig亚类(型)及抗原结合的动力学进行研究. 方法用HEV ORF2区基因工程重组蛋白NE2, 免疫BALB/c小鼠, 经杂交瘤技术制备mAb, 采用ELISA、Western blot和生物传感器鉴定其有关特性.结果获得12株可稳定分泌抗NE2 mAb的杂交瘤细胞系.用ELISA及生物传感器等鉴定各株mAb, 分别为IgM和IgG1、IgG2a, 轻链均为κ型.其中在用ELISA法对mAb 3F5亚类鉴定过程中, 发现其与HRP-GAM IgG2a和HRP-GAM IgM均有反应, 生物传感器鉴定其为IgM.Western blot验证各株mAb的特异性, 同时各株mAb对于不同聚合形式的NE2蛋白的反应性有一定的差别.应用生物传感器测定了4株mAb的KD值, mAb 8C11为4.36×10-7, mAb 8H3为1.53×10-5, mAb 13D8为1.21×10-6, mAb 16D7为8.03×10-7.从生物传感器测得的各株mAb与NE2的结合、解离过程中发现, mAb 8H3与NE2可快速结合、快速解离, 其它3株mAb结合稳定.结论经多种方法鉴定, 所获得的12株杂交瘤细胞分泌的抗体, 为抗HEV ORF2区段的特异性抗体.