乙型肝炎病毒DNA荧光定量PCR的建立与应用

• 作者: 周武 王忠永 袁谦 陈晓东 陶志华
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 荧光定量 聚合酶链反应 乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸
• 年，卷（期）: 2002,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 282-284
• 页数: 3页
• 分类号: R512.62
• 字数: 3156字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-764X.2002.05.008

摘要

目的建立血浆(血清)HBV DNA荧光定量PCR检测方法,探讨其临床应用价值.方法用PUCm-T载体和PCR纯化产物连接,转染DH5α菌,筛选阳性菌落,提取质粒,制作外标准品;在HBV基因组S区设计一对引物和TaqMan探针,严格优化反应物的组成和扩增条件,并对该方法进行评价.结果建立的HBV DNA荧光定量PCR最低可检出800拷贝/ml;批内误差为1.8%～6.5%,批间误差为2.6%～9.1%;在104～1011拷贝/ml之间与Ct值具有很好的线性(Ct=-1.3911 ln(X)+41.65,r=-0.9958);外周血HBV DNA临床定量检测发现,HBeAg阳性的130例中,HBV DNA阳性率为100%,含量为106.89±1.69拷贝/ml,抗HBe阳性的96例中HBV DNA阳性率为55.2%(53/96),含量为104.09±1.19拷贝/ml;62例献血员未检出HBV DNA.乙肝临床治疗监测发现,外周血中HBV DNA含量检测可有效反映治疗效果,指导临床用药.结论荧光定量PCR检测方法是一种相对准确、灵敏度高、特异性较强和较简便的HBV DNA定量检测技术,对乙肝诊断、指导临床用药和治疗监测方面具有实用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶志华	温州医学院附属第一医院检验科	96	602	15.0	20.0
2	陈晓东	温州医学院附属第一医院检验科	70	572	15.0	21.0
3	周武	温州医学院附属第一医院检验科	48	406	12.0	18.0
4	袁谦	温州医学院附属第一医院检验科	51	572	13.0	22.0
5	王忠永	温州医学院附属第一医院检验科	25	176	8.0	12.0