鸭乙型肝炎病毒荧光定量PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 刘扬科 常俊标 张金来 杨猛 杨霞 王川庆 王庆端 赵军 郑立运 陈陆
• 来源期刊: 扬州大学学报（农业与生命科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭乙型肝炎病毒 SYBR Green I 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 7-12
• 分类号: S852.65+9.1|R512.6+2
• 字数: 5080字
• 语种: 中文

摘要

为建立一种快速、特异的鸭乙型肝炎病毒(DHBV) SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法,设计一对引物扩增DHBV基因组,将其克隆到pMD-18-T载体上,然后以该重组质粒为模板,选择DHBV S基因保守序列设计一对定量PCR引物,构建标准曲线,进行特异性、敏感性和重复性试验,并用所建立的方法评价拉米夫定和阿德福韦酯在鸭体内对DHBV-DNA复制的抑制效果.结果表明: 该方法能特异性检测到DHBV;相关系数为1.00,扩增效率为105%;敏感度高,最低检测限为70个拷贝.拉米夫定和阿德福韦酯对DHBV感染后鸭外周血DHBV-DNA 的复制均有很好的抑制效果,但停药后会出现轻度"反跳"现象.建立的DHBV SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法具有特异、灵敏、快速等优点,可用于抗HBV药物的评价.