禽偏肺病毒Taqman荧光定量PCR方法的建立及应用

• 作者: 刘佳佳 周庆丰 操胜 王占新 田野 覃健萍 陈峰 鲁俊鹏
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: C亚型番鸭偏肺病毒 荧光定量PCR Taqman荧光探针
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 34-36,中插4
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65+1
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中aMPV-C P基因序列,设计出一对特异性引物和Taqman探针,建立了aMPV-CTaqman探针荧光定量PCR方法.对该反应体系进行优化,进行特异性、敏感性及重复性试验,并且建立标准曲线.结果表明,该方法只对aMPV-C检测为阳性,具有良好的特异性;能够检测到(3.63 ×102)拷贝数,具有良好的敏感性;建立的标准曲线斜率为-3.312,截距为44.66,相关系数为R2 =0.999,循环阈值和模板拷贝数具有良好的相关性,组内及组间重复性好.采用aMPV-C Taqman探针荧光定量方法、普通PCR方法对来自广东、浙江地区25份番鸭疑似阳性aMPV-C的病料进行检测,其中前者23份阳性,后者18份阳性.这表明aMPV-C Taqman荧光定量PCR方法对样品的检测具有特异性和敏感性高的特点,更适合临床样品的检测.