Hsv-tk、重组人TNF-α融合基因表达载体的构建及瞬时表达

• 作者: 张惠中 成诗银 鱼兵
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: Hsv-tk基因 肿瘤坏死因子-α 融合基因 表达
• 年，卷（期）: 2002,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 20-23，28
• 页数: 5页
• 分类号: Q782
• 字数: 4032字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2002.08.007

摘要

目的:构建pEGFP-TK-rhTNF-α表达载体,观察其在喉癌细胞Hep-2中的瞬时表达.方法:应用PCR方法对各目的基因进行扩增并经测序载体pGEM-T-Easy测序,利用逆转录病毒载体PLXSN中的多克隆位点将二者融合为融合基因TK-rhTNF-α并将其亚克隆至pEGFP-N3的EcoRI和BamHI位点间,成功构建表达载体pEGFP-TK-rhTNF-α,并在该载体转染人喉癌细胞Hep-2后观察融合蛋白表达情况.结果:酶切鉴定证实TK-rhTNF-α融合基因片段已克隆到pEGFP-N3的EcoRI和BamHI位点间,并在转染人喉癌细胞Hep-2中观察到TK-rhTNF-α融合基因及绿色荧光蛋白的表达.结论:pEGFP-TK-rhTNF-α表达载体便于观察转染细胞中TK-rhTNF-α融合蛋白的表达情况及蛋白定位,为自杀基因联合细胞因子基因疗法提供有利条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张惠中	第四军医大学唐都医院骨肿瘤研究所	196	724	13.0	17.0
2	成诗银	第四军医大学唐都医院耳鼻喉科	27	131	6.0	9.0
3	鱼兵	第四军医大学唐都医院耳鼻喉科	14	104	6.0	9.0