重组人突变型471TNF-α及野生型TNF-α的表达及活性初步鉴定

• 作者: 司履生 孔令洪 尚宁宽 李瑶琛 王一理 耿宜萍
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: TNF-α 突变体 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 14-16,29
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2003.01.004

摘要

目的采用原核表达系统,表达人突变型471TNF-α蛋白,并检测其生物学活性.方法采用PCR技术扩增突变型471TNF-α及野生型TNF-α cDNA片段,克隆入中间载体pUCm-T中,并测序证实.以限制性内切酶切下目的片段,克隆入pBV220中,转入大肠杆菌DH5α,温度诱导表达野生型及突变型471TNF-α蛋白.初步纯化蛋白后,采用MTT法评估两者对L929细胞的杀伤作用.结果①获得了测序正确的野生型TNF-α及突变型471TNF-α的cDNA克隆;②构建了正常人野生型TNF-α及突变型471TNF-α重组表达质粒;③经温度诱导,TNF-α及突变型471TNF-α蛋白均获得了表达;④初步的生物学活性研究表明,突变型471TNF-α蛋白的杀伤作用显著高于野生型.结论突变型471TNF-α的生物学活性优于野生型TNF-α,为进一步开展TNF-α的基础及临床研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王一理	西安交通大学生命科学与技术学院免疫病理研究室	112	527	9.0	17.0
2	耿宜萍	西安交通大学生命科学与技术学院免疫病理研究室	18	77	6.0	7.0
3	司履生	西安交通大学生命科学与技术学院免疫病理研究室	63	275	8.0	12.0
4	孔令洪	西安交通大学生命科学与技术学院免疫病理研究室	17	54	4.0	6.0
5	李瑶琛	西安交通大学生命科学与技术学院免疫病理研究室	6	21	3.0	4.0
6	尚宁宽	西安交通大学生命科学与技术学院免疫病理研究室	6	18	3.0	4.0