犬钩虫特异性抗原基因的克隆与表达

• 作者: 刘森 李铁华 薛海筹 郭湘荣
• 来源期刊: 中国寄生虫学与寄生虫病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 犬钩虫抗原 免疫筛选 克隆表达
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 12-15
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2639字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7423.2003.01.005

摘要

目的寻找可诱发宿主保护性免疫力的犬钩虫特异性抗原.方法用犬钩蚴免疫获得保护性免疫力的家犬血清,免疫筛选犬钩虫Ⅲ期幼虫λZAPⅡcDNA文库,阳性克隆基因经测序,在质粒PUC18、PET28中进行一系列亚克隆,重组pET28C质粒诱导表达并对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting分析.结果从cDNA文库中筛获5个相同的阳性克隆,携带的犬钩虫抗原(AcAg)外源基因片段在原核体系(pET28C)中表达分子量为43kDa的融合蛋白.Western blotting分析该重组蛋白可与筛库的犬血清反应.结论 AcAg为新的犬钩虫特异性抗原,其基因与美丽纤杆线虫(Caenorhabditis elegans)基因unc-89同源性为35%.该抗原诱发宿主保护性免疫力及作为疫苗的潜力值得进一步研究.