血小板血型抗原HPA-2在CHO细胞中的表达

• 作者: 王字玲 王波 苏丽 赵莲
• 来源期刊: 临床输血与检验
• 学科: 医学
• 关键词: 血小板抗原 表达 CHO细胞
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4-6
• 页数: 3页
• 分类号: R392.11|R392.12
• 字数: 2287字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2003.01.002

摘要

目的在CHO细胞中表达血小板血型抗原HPA-2a和2b.方法从人巨核细胞系MO7e中采用RT-PCR方法扩增出血小板血型抗原HPA-2抗原位点所在的血小板糖蛋白Ⅰb氨基端302个氨基酸的cDNA,并将第434位的C突变为T,使得相应的氨基酸苏氨酸(Thr)突变为蛋氨酸(Met).将HPA-2a和2b基因插入真核表达质粒pcDNA3.1(+),将重组质粒pHPA2a和pHPA2b以脂质体介导的转染方法导入CHO细胞中,以G418筛选获得抗性克隆,表达产物用瑞斯托菌素诱导血小板凝集试验的抑制作用测定活性.结果获得了人血小板血型抗原HPA-2a和HPA-2b的基因,并在CHO细胞中进行了表达.表达产物具有vWF结合功能.结论成功地表达了人血小板血型抗原HPA-2a和HPA-2b,对进一步研究血型抗原特定表位及功能、检测同种异体抗体和研究同种抗原引起的免疫性血小板减少性紫癜的发病机制具有重要意义.