重组血小板糖蛋白Ibα活性片段在CHO细胞中表达及其功能研究

• 作者: 沈飞 董宁征 赵益明 邵波静 阮长耿
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CHO细胞 重组糖蛋白Ibα 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 108-111
• 页数: 4页
• 分类号: R392|Q78
• 字数: 3497字
• 语种: 中文

摘要

目的:建立表达重组糖蛋白Ibα活性片段(rGPIbαH1-V289)细胞株,并且纯化其表达产物,研究其生物学功能.方法:利用脂质体将含有编码GPIbαH1-V289 的DNA质粒pCMV3转染CHO细胞.用亲和层析法纯化重组片段.用SDS-PAGE和Western blot鉴定纯化产品的纯度和免疫学活性.用血小板聚集法检测纯化产品对瑞斯托霉素诱导血小板聚集功能的影响.用ELISA测定纯化产品对vWF与血小板结合能力的影响.结果:每1 L培养上清液可纯化到6.15 mg rGPIbαH1-V289重组产品.SDS-PAGE显示,纯化的重组片段主要在42 kD处显一蛋白区带,Western blot显示,抗GPIbα单抗SZ-2能与重组片段在42 kD处显单一蛋白区带.纯化重组片段能抑制瑞斯托霉素诱导的血小板聚集功能.ELISA测定显示纯化产品抑制血浆vWF与血小板的结合能力.结论:CHO细胞株A1能恒定表达rGPIbαH1-V289,重组片段具有较高的纯度、免疫学活性和生物学活性,有可能开发为有效的抗血栓药物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董宁征	苏州大学附属第一人民医院江苏省血液研究所	42	164	7.0	11.0
2	沈飞	苏州大学附属第一人民医院江苏省血液研究所	22	56	3.0	6.0
3	阮长耿	苏州大学附属第一人民医院江苏省血液研究所	188	746	13.0	17.0
4	赵益明	苏州大学附属第一人民医院江苏省血液研究所	50	194	7.0	10.0
5	邵波静	苏州大学附属第一人民医院江苏省血液研究所	9	30	3.0	5.0