抑制消减杂交结合cDNA微阵列技术鉴定人肾癌组织高表达基因谱

• 作者: 严泉剑 张志文 朱宏建 艾军魁 辛殿祺 辛钟成 那彦群 郭应禄
• 来源期刊: 中国科学C辑
• 学科: 医学
• 关键词: 抑制消减杂交 基因芯片 肾癌 基因 差异表达
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 页码范围: 436-445
• 页数: 10页
• 分类号: R73
• 字数: 5482字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1006-9259.2003.05.008

摘要

为克隆肾癌组织高表达基因, 探讨肾癌发生、发展的分子基础, 以人肾癌组织mRNA为试验方, 正常肾组织mRNA为对照构建抑制消减杂交文库. 用文库379个克隆制作基因芯片, 以同位素标记探针对文库进行高通量筛选, 对肾癌组织中表达增高6倍以上的67个克隆进行测序, 结果在GenBank中进行比对分析, 其中4个克隆为新EST片段, 2个为KIAA类基因, 其余克隆为已知基因. 其中已有文献报道的肾癌相关基因, 如VEGF, 波形蛋白, 组织因子等, 大部分为新发现的肾癌相关基因, 包括锌带蛋白、垂体瘤转化基因1等. 3个EST及一些在肾癌组织中高表达的已知基因以Northern杂交、RT-PCR作了验证. 免疫组化与Western blot 进一步证实锌带蛋白与垂体瘤转化基因1在肾癌组织中表达显著增强. 这些高表达的基因可能成为肾癌诊断、治疗的潜在靶点, 有助于从基因谱的角度进一步认识肾癌发生、发展的分子机制.