BALB/c鼠枯否细胞的分离培养与鉴定

• 作者: 万德森 张森 肖锡宾
• 来源期刊: 结直肠肛门外科
• 关键词: 枯否细胞(Kupffer Cell) 分离 鉴定 BALB/c鼠
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 88-92
• 页数: 5页
• 分类号: R392.12|R446.63
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-0491.2003.02.008

摘要

目的:肝脏是肿瘤转移的好发部位,而肝脏含有丰富的免疫细胞-枯否细胞(Kupffer Cell,KC).为研究枯否细胞的抗癌活性,旨在探讨BALB/c鼠枯否细胞的分离培养方法.方法:选用健康雄性8～10周龄BALB/c鼠,麻醉无菌取肝,注射冲洗去血并剪去部分结缔组织,小玻璃瓶中剪碎肝组织,加入0.04%的EDTA和0.05%链霉蛋白酶E溶液,交替轻轻吹打消化.不锈钢筛网滤过,用0.004% Dnase Ⅰ的1640液清洗细胞液,加Tris-氯化胺溶解红细胞.30%～70%Percoll梯度离心,10%FBS贴壁培养4～6 h洗去非贴壁细胞.通过对比体内、体外枯否细胞吞噬墨水和体外吞噬聚苯乙烯乳珠(latexbeads,D1.1μm)鉴定枯否细胞.结果:Kupffer细胞的得率为(7.57±1.92)×106个/鼠肝,即6.15×106个/g,贴壁率为40.18%.用0.4%台盼蓝染色鉴定,细胞存活率在95%以上,吞噬鉴定发现Kupffer细胞的纯度可达90%.贴壁Kupffer细胞的形态多样,可见不规则,多边形,多角伪足,典型的星形及多角形.体外培养枯否细胞存活2周后未见再有吞噬功能.结论:酶消化法结合梯度离心和贴壁培养是分离BALB/c鼠枯否细胞的可靠方法,为进一步实验打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	万德森		113	1674	20.0	37.0
2	张森	广西医科大学第一附属医院大肠肛门病外科	46	257	10.0	13.0
3	肖锡宾		14	124	7.0	11.0