猪γ干扰素的基因克隆、改造、表达及活性测定

• 作者: 周斌 曹瑞兵 陈德胜 陈溥言
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪γ 干扰素 基因改造 原核表达 分离纯化
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 页码范围: 71-75
• 页数: 5页
• 分类号: Q786|S859.79+7
• 字数: 4017字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-2030.2003.02.017

摘要

提取经ConA诱导培养的猪外周血白细胞总RNA,RT-PCR扩增出猪IFN-γ基因并克隆到pGEM-T-easy载体,测序结果表明扩增片段是含有信号肽的猪IFN-γ的完整基因.设计1对引物亚克隆猪IFN-γ成熟蛋白基因并对其5′端前2个稀有密码子进行大肠杆菌偏嗜性改造.经测序鉴定后插入原核表达载体pRLC,并实现在大肠杆菌中的高效表达.表达产物以包涵体形式存在,经7 mol@L-1盐酸胍的变性液溶解及0.5 mol@L-1盐酸胍复性液复性处理,表达产物进行脱盐、凝胶层析纯化.细胞病变抑制法测定结果表明,重组猪IFN-γ具有较高的干扰素活性,约为4.5×106U.mg-1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈溥言	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	269	2875	28.0	40.0
2	周斌	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	62	792	17.0	26.0
3	曹瑞兵	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	71	897	19.0	28.0
4	陈德胜	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	34	786	14.0	27.0