人可溶性4-1BBL在毕氏酵母中的表达及其协同刺激效应的研究

• 作者: 古涛 张学光 徐颖 沈丽琴 邓忠彬 马泓冰 黄伟达
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人可溶性4-1BBL 毕氏酵母 表达 协同效应
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 17-20
• 页数: 4页
• 分类号: R392.1
• 字数: 3152字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2003.01.005

摘要

目的: 通过甲醇营养型毕氏酵母蛋白质表达系统,表达出具有生物活性的人可溶性4-1BBL重组蛋白.方法: PCR方法从XG-4-1BBL转基因细胞中获得4-1BBL的胞外段基因;利用酵母表达载体pPICZαA构建重组质粒pPICZαA-s4-1BBL,经线性化后电转化导入毕氏酵母GS115中,甲醇诱导表达;SDS-PAGE蛋白电泳和Western blot分析发酵上清中hs4-1BBL蛋白表达水平及其特异性;体外T细胞增殖试验(3H-TdR掺入法)观察rhs4-1BBL 蛋白的生物学活性.结果: (1)成功地扩增到4-1BBL的胞外段基因,酶切鉴定及测序结果与已知的基因序列一致;(2)SDS-PAGE蛋白电泳和Western blot结果显示所获重组蛋白的分子量与预期分子量(21 kD)相同,并可被4-1BBL特异性抗体识别;(3)重组蛋白在体外具有协同促进T细胞增殖的效应.结论: 成功地在毕氏酵母表达系统中表达出具有生物学活性的人可溶性4-1BBL重组蛋白,为进一步研究其功能奠定了物质基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张学光	苏州大学生物技术研究所	399	1957	18.0	24.0
2	沈丽琴	苏州大学生物技术研究所	33	164	6.0	11.0
3	徐颖	苏州大学生物技术研究所	94	702	11.0	22.0
4	马泓冰	苏州大学生物技术研究所	24	62	5.0	6.0
5	邓忠彬	苏州大学生物技术研究所	13	68	5.0	7.0
6	古涛	苏州大学生物技术研究所	12	119	7.0	10.0
7	黄伟达	上海复旦大学生化系	3	3	1.0	1.0