人重组白细胞介素11在毕氏酵母系统中的表达及纯化

• 作者: 张学光 徐颖 朱剑昆 许志祥 谢炜 闵太善 黄伟达
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 重组人白细胞介素-11(rhIL-11)毕氏酵母表达分离纯化
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 127-131
• 页数: 5页
• 分类号: R392.1
• 语种: 中文

摘要

目的在甲醇营养型毕氏酵母蛋白质表达系统中高效表达人白细胞介素-11(rhIL-11)，便于进一步开发。方法以人工设计合成的rhIL-11基因，构建表达载体pPICZαA-IL-11，经线性化后电转化导入毕氏酵母菌株KM71，甲醇诱导表达，用ELISA和SDS-PAGE检测发酵上清中IL-11的抗原性和表达量，用IL-11依赖的B9-11细胞株分析其生物学活性，采用疏水层析、离子交换和凝胶过滤纯化发酵上清中的IL-11。结果序列分析表明，克隆载体中IL-11人工基因序列与设计相符；基因工程菌株KM71-2424在摇瓶培养上清中IL-11的表达量超过60mg/L，生物学活性测定显示其比活性为5.5×107U/mg，而标准品的生物学活性为2.2×107 U/mg。经过三步层析纯化得到电泳纯的rhIL-11蛋白质。结论成功获得IL-11人工基因和稳定分泌重组蛋白的基因工程菌株KM71-2424，该重组蛋白的生物学活性显著高于大肠杆菌表达的标准品，并获得较高纯度的重组蛋白。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢炜	苏州大学免疫教研室	18	146	6.0	11.0
2	张学光	苏州大学免疫教研室	399	1957	18.0	24.0
3	徐颖	苏州大学免疫教研室	94	702	11.0	22.0
4	许志祥	苏州大学免疫教研室	13	68	4.0	8.0
5	朱剑昆	苏州大学免疫教研室	5	57	3.0	5.0
6	黄伟达	苏州大学免疫教研室	2	42	2.0	2.0
7	闵太善	苏州大学免疫教研室	1	39	1.0	1.0