弓形虫PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 王胜昌 谢建云 邵伟娟 高诚
• 来源期刊: 上海实验动物科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 弓形虫 一次PCR 套式PCR 半套式PCR ICR小鼠
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 实验动物与动物实验
• 页码范围: 15-18,20
• 页数: 5页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 3050字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2003.01.005

摘要

根据弓形虫P30基因序列设计二对引物分别进行了PCR一次扩增和套式扩增,结果这两对引物在一次扩增和套式扩增中分别出现预期的扩增片段914bp、522bp和522bp;套式扩增出现的条带比一次扩增出现的条带亮度明显增强.提示套式扩增比一次扩增具有更高的敏感性.用外引物进行扩增后,最低可以检测到1pg的弓形虫DNA.说明所建立的反应体系具有高度的敏感性.用内引物对人工感染弓形虫的ICR小鼠血液、组织进行弓形虫DNA的检测,结果均扩增出522bp的扩增带.根据B1基因序列设计的引物进行PCR一次扩增和半套式扩增.结果均出现预期的扩增片段619bp、362bp和362bp;用半套式扩增检测感染弓形虫的ICR小鼠血液、组织时可扩增出522bp的扩增带,半套式扩增比一次扩增更敏感.