生长抑素(SS)基因在pET-32表达系统中的高效表达

• 作者: 刘文波 刘永庆 杜念兴 潘杰彦 赵国屏 陈溥言
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 生长抑素(SS) pET-32表达系统 异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG) 乳糖 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 页码范围: 61-65
• 页数: 5页
• 分类号: Q785
• 字数: 3953字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-2030.2003.01.014

摘要

分别将SS基因克隆至pET-32a和pET-32c表达系统中,得到重组质粒SS-N/X和SS-N/S.实验结果表明,SS-N/X-Thioredoxin(硫氧还原蛋白)和SS-N/S-Thioredoxin融合蛋白在IPTG(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)诱导3 h后(37 ℃)表达产量最高,约占菌体总蛋白的30%左右.0.05～1 mmol*L-1 IPTG对SS融合蛋白表达产量的影响并不太大,0.05 mmol*L-1 IPTG即可达到有效的诱导效果,但单位体积内的表达产量以0.5 mmol*L-1时为最高.乳糖诱导4 h(37 ℃)的效果明显低于IPTG,但当培养时间延长至8 h时,20 mg*mL-1的乳糖可达到与IPTG同样的诱导效果,10和5 mg*mL-1的乳糖也可接近IPTG的诱导效果.SS-N/X融合蛋白在26 ℃表达时,主要以可溶性形式存在,占75.8%,包涵体仅占24.2%;而SS-N/S融合蛋白则主要以包涵体形式存在,占60.2%,可溶性蛋白仅占39.8%.SS可溶性融合蛋白具有良好的SS抗原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈溥言	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	269	2875	28.0	40.0
2	潘杰彦	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	13	181	7.0	13.0
3	刘永庆	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	6	40	4.0	6.0
4	杜念兴	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	29	150	8.0	10.0
5	赵国屏	中国科学院上海生物工程研究中心	52	207	7.0	11.0
6	刘文波	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	7	143	4.0	7.0