人晶状体上皮细胞系内肌醇1,4,5-三磷酸受体和兰尼碱受体的表达和作用

• 作者: 张劲松 曲勃
• 来源期刊: 中华眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 晶体 上皮细胞 受体,胞质和核 钙通道 兰尼碱受体钙释放通道
• 年，卷（期）: 2003,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 389-394
• 页数: 6页
• 分类号: R77
• 字数: 4712字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0412-4081.2003.07.002

摘要

目的确定人晶状体上皮细胞(HLEC)系LEC-B3细胞内两种钙池调控系统肌醇1,4,5-三磷酸(IP3) 受体和兰尼碱受体的表达,并鉴定其亚型,初步探讨两系统对HLEC内Ca2+的调控作用.方法传代培养HLEC系LEC-B3细胞,选用第3代融合状态良好的细胞,提取细胞总RNA,反转录获取cDNA,分别用IP3受体的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ亚型和兰尼碱受体的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ亚型特异引物进行逆转录聚合酶链反应,判定分析mRNA的表达.并在激光扫描共聚焦显微镜下分别采用一定浓度的乙酰胆碱、阿托品、咖啡因、兰尼碱及普鲁卡因作用于细胞外液含Ca2+、Mg2+和不含Ca2+、Mg2+的同代细胞,观察分析Ca2+信号的变化.结果 HLEC系LEC-B3细胞中分别表达IP3受体和兰尼碱受体的Ⅰ和Ⅲ型mRNA,且均Ⅲ型表达强于Ⅰ型(P<0.05).10 μmol/L乙酰胆碱、10 mmol/L咖啡因及50 μmol/L兰尼碱均可使细胞内Ca2+浓度增高,而波动的开始时间、幅度及持续时间因细胞外液成分和药物不同而异;1 μmol/L阿托品可阻断乙酰胆碱的作用,50 μmol/L普鲁卡因可抑制兰尼碱的作用.结论 HLEC系LEC-B3细胞内同时存在IP3受体和兰尼碱受体基因的转录,且存在亚型特异性.两种受体的激动剂和抑制剂均可引起细胞内Ca2+浓度的变化,提示IP3受体和兰尼碱受体系统在HLEC内Ca2+浓度的调控中同时发挥重要作用,其中IP3受体对Ca2+更为敏感.