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摘要:
目的为筛选、克隆小鼠短指/缺指畸形肢体的特异表达基因,构建了GD18小鼠畸形肢体(短指/缺指)与正常肢体的差异表达的cDNA消减文库.方法应用抑制消减杂交技术(SSH),结合PCR cDNA合成法,将从总RNA中合成的双链cDNA,酶切成平均大小为400~600 bp的片段,经接头连接,两次消减杂交和两次抑制性PCR后,将产物与T/A载体连接构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,菌液PCR筛选有插入片段的SSH克隆.结果成功地构建了GD18小鼠畸形肢体(短指/缺指)差异表达的cDNA消减文库,从中挑取275个克隆进行菌液PCR分析,结果显示其中255均得到200~600 bp插入片段.结论 SSH与PCR合成双链cDNA,是一种自微量总RNA中构建高特异性的差异表达cDNA消减文库的有效方法.消减文库的构建,有助于筛选、克隆小鼠短指/缺指畸形肢体的特异表达基因.
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文献信息
篇名 小鼠短指/缺指畸形肢体cDNA消减文库的构建
来源期刊 中国药理学与毒理学杂志 学科 医学
关键词 短指 少指 基因表达 基因文库
年,卷(期) 2003,(4) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 281-285
页数 5页 分类号 R965.1
字数 4360字 语种 英文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 朱江波 第二军医大学卫生毒理学教研室 47 133 7.0 9.0
2 张天宝 第二军医大学卫生毒理学教研室 83 399 11.0 16.0
3 印木泉 第二军医大学卫生毒理学教研室 33 156 8.0 11.0
4 陈蓉芳 第二军医大学卫生毒理学教研室 16 47 3.0 6.0
5 郭苗莉 第二军医大学卫生毒理学教研室 11 51 4.0 7.0
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研究主题发展历程
节点文献
短指
少指
基因表达
基因文库
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国药理学与毒理学杂志
月刊
1000-3002
11-1155/R
大16开
北京太平路27号
82-140
1986
chi
出版文献量(篇)
2901
总下载数(次)
9
总被引数(次)
24241
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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