小鼠短指/缺指畸形肢体cDNA消减文库的构建

• 作者: 印木泉 张天宝 朱江波 郭苗莉 陈蓉芳
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 短指 少指 基因表达 基因文库
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 281-285
• 页数: 5页
• 分类号: R965.1
• 字数: 4360字
• 语种: 英文

摘要

目的为筛选、克隆小鼠短指/缺指畸形肢体的特异表达基因,构建了GD18小鼠畸形肢体(短指/缺指)与正常肢体的差异表达的cDNA消减文库.方法应用抑制消减杂交技术(SSH),结合PCR cDNA合成法,将从总RNA中合成的双链cDNA,酶切成平均大小为400～600 bp的片段,经接头连接,两次消减杂交和两次抑制性PCR后,将产物与T/A载体连接构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,菌液PCR筛选有插入片段的SSH克隆.结果成功地构建了GD18小鼠畸形肢体(短指/缺指)差异表达的cDNA消减文库,从中挑取275个克隆进行菌液PCR分析,结果显示其中255均得到200～600 bp插入片段.结论 SSH与PCR合成双链cDNA,是一种自微量总RNA中构建高特异性的差异表达cDNA消减文库的有效方法.消减文库的构建,有助于筛选、克隆小鼠短指/缺指畸形肢体的特异表达基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱江波	第二军医大学卫生毒理学教研室	47	133	7.0	9.0
2	张天宝	第二军医大学卫生毒理学教研室	83	399	11.0	16.0
3	印木泉	第二军医大学卫生毒理学教研室	33	156	8.0	11.0
4	陈蓉芳	第二军医大学卫生毒理学教研室	16	47	3.0	6.0
5	郭苗莉	第二军医大学卫生毒理学教研室	11	51	4.0	7.0