食管癌消减cDNA文库的构建

• 作者: 姜国忠 张云汉 殷智榕 郝志芳 陈东 高冬玲
• 来源期刊: 河南医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 食管癌 消减抑制杂交 cDNA文库
• 年，卷（期）: 2001,（5）
• 所属期刊栏目: 系列研究
• 页码范围: 515-518
• 页数: 4页
• 分类号: R735.1
• 字数: 3113字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2001.05.001

摘要

目的:采用消减抑制杂交技术,研究正常食管粘膜和食管癌组织之间的基因表达差异状况,分离食管癌相关基因片段,构建食管癌的消减cDNA文库.方法:以食管癌癌组织为测试子(tester),以正常食管粘膜组织为驱赶子(driver),用消减抑制杂交方法分离食管癌差异表达片段.将该差异表达片段克隆至T载体,经蓝白斑筛选后, 再用PCR方法插入片段筛选出阳性重组质粒,构建食管癌消减cDNA文库.结果:用消减抑制杂交技术分离食管癌差异表达片段,经蓝白斑筛选,得到220个白色克隆;再用PCR方法快速筛选出100个两端分别含连接子Adaptorl 及Adaptor2R的阳性重组质粒100个,从而成功地构建了中国人食管癌特异的消减cDNA文库.结论:构建了中国人食管癌特异的消减cDNA文库.消减抑制杂交技术能快速有效地分离差异表达基因,方法简便、灵敏度高.使用PCR法快速筛选阳性克隆,对于消减文库的构建具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高冬玲	河南医科大学第一附属医院病理科	24	56	4.0	6.0
2	殷智榕	河南医科大学第一附属医院病理科	14	64	4.0	7.0
3	郝志芳	河南医科大学第一附属医院病理科	7	15	2.0	3.0
4	陈东	河南医科大学第一附属医院病理科	16	75	5.0	8.0
5	张云汉	河南医科大学第一附属医院病理科	29	97	6.0	8.0
6	姜国忠	河南医科大学第一附属医院病理科	7	18	2.0	4.0