人食管癌细胞cDNA表达文库的构建和鉴定

• 作者: 冯璐 张哲 武翔宇 罗敏娜 赵新汉 邵珊 黄尚科
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 食管癌 噬菌体 cDNA 表达文库
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 786-789
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人食管癌细胞cDNA噬菌体表达文库.方法 从食管癌细胞中提取总RNA,利用磁珠吸附法分离其中的mRNA,逆转录合成cDNA第一链,再通过碱基互补配对原则合成第二链,对双链cDNA进行末端修饰,连接EcoR Ⅰ适配子,磷酸化EcoR Ⅰ适配子5'端,除去不合要求的cDNA片段,将符合要求的与载体(噬菌体T7 Select10-3b)连接,然后进行体外包装建成初步的cDNA文库,并对文库进行鉴定.结果 食管癌细胞cDNA原始表达文库的滴度为2.01×106 pfu/mL,重组率高达100％,插入片段的大小范围在300～1 500 bp之间.结论 本实验成功构建了人食管癌T7噬菌体展示cDNA表达文库,并经过了初步鉴定,为下一步利用重组表达cDNA克隆的血清学分析技术(SEREX技术)鉴定食管癌相关抗原奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵新汉	西安交通大学第一附属医院肿瘤内科	61	286	9.0	13.0
2	张哲	西安交通大学第一附属医院中医科	49	408	10.0	19.0
3	黄尚科	西安交通大学第一附属医院肿瘤内科	5	30	3.0	5.0
4	冯璐	西安交通大学第一附属医院肿瘤内科	2	13	1.0	2.0
5	武翔宇	西安交通大学第一附属医院肿瘤内科	3	18	1.0	3.0
6	罗敏娜	西安交通大学第一附属医院肿瘤内科	3	4	1.0	2.0
7	邵珊	西安交通大学第一附属医院肿瘤内科	1	0	0.0	0.0