鸡胚成纤维细胞cDNA T7噬菌体表达文库的构建和鉴定

• 作者: 张改平 朱礼倩 李清州 赵绪永
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡胚成纤维细胞(CEF) T7噬菌体 cDNA表达文库
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 100-103
• 页数: 4页
• 分类号: S831
• 字数: 3027字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2008.07.032

摘要

构建鸡胚成纤维细胞(CEF)T7噬菌体表达型cDNA文库,为筛选和研究CEF上病毒受体分子奠定基础.提取纯化CEF的mRNA,反转录合成双链cDNA,补平末端,连接EcoR Ⅰ/HindⅢ接头,双酶切,凝胶过滤层析除去小于400bp的cDNA片段,合成双链cDNA定向与T7噬菌体左右臂连接,体外包装后建成cDNA表达文库.测定文库大小、重组率,并以PCR鉴定cDNA插入片段的大小.结果表明,构建的cDNA文库滴度为2.2×107pfu/mL、扩增后滴度为3.5×1010pfu/mL,重组效率达98%、插入片段多在0.4～3 kb之间,平均插入片段长约1.3 kb.表明所建文库具有很高的质量,从而为筛选目的cDNA克隆奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张改平		103	840	15.0	24.0
2	赵绪永		25	132	6.0	10.0
4	李清州		9	47	3.0	6.0
7	朱礼倩		6	23	3.0	4.0