风湿性心脏病心肌组织噬菌体表达文库的构建和分析

• 作者: 余细勇 卢聪 孟锦绣 朱平 李运雄 郑少忆
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 关键词: 风湿性心脏病 噬菌体表达文库 构建
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1398-1400
• 页数: 3页
• 字数: 3141字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2012.09.003

摘要

目的:构建风湿性心脏病患者心脏组织噬菌体表达文库.方法:外科手术治疗中取风湿性心脏病患者新鲜心耳组织,用QIAGEN试剂盒提取RNA,用逆转录酶合成cDNA第一链,用长距离PCR合成双链cDNA,SfiⅠ酶切cDNA后过柱分级收集,用T4 DNA连接酶重组连接入λTriplEx2载体,最后用λ噬菌体包装后构建成原始文库,用PCR、X-gal等方法进行文库质量鉴定.结果:构建了风湿性心脏病心肌组织噬菌体表达文库,原始文库滴度为3.3×106 pfu/mL,重组率为99％,81.25％外源重组片段大于1 kb.结论:成功构建了高质量的风湿性心脏病患者心肌组织噬菌体表达文库,为风湿性心脏病的分子机制寻找新的研究策略奠定了实验基础.