霜天蛾cDNA表达文库的构建和初步鉴定

• 作者: 刘昀 孙秀珍
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 霜天蛾 cDNA表达文库 鉴定
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 244-246,279
• 页数: 4页
• 分类号: R593.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2005.03.013

摘要

目的构建霜天蛾cDNA表达文库,为进一步筛选霜天蛾主要变应原、制备重组变应原奠定基础.方法利用Trizol法抽提霜天蛾RNA,经过Oligo(dT)纤维素柱纯化后得到mRNA,反转录合成ds cDNA,连接EcoRⅠ接头,末端磷酸化,XhoⅠ消化,将双末端黏性化的双链ds cDNA经过凝胶柱层析,收集大于400 bp的cDNA片段,加工后与Uni-ZAP XR Vector连接,经过体外包装,感染宿主菌,构建cDNA文库,检测文库容量和重组效率,并采用PCR方法对插入的cDNA片段大小进行分析.结果成功构建了一个含有5 ×105重组子的霜天蛾表达文库,重组率为67%,平均插入片段长度约为1.49 kb. 结论所建文库容量及插入片段大小合适,适用于筛选目的cDNA克隆.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘昀	西安交通大学第二医院呼吸内科	60	271	9.0	12.0
2	孙秀珍	西安交通大学第二医院呼吸内科	76	424	11.0	16.0