人骨肉瘤9607细胞cDNA表达文库的构建和鉴定

• 作者: 廖博 张惠中 张鹏 范清宇 陈刚 马保安 龙华
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨肉瘤 转录 ,遗传 基因文库
• 年，卷（期）: 2003,（14）
• 所属期刊栏目: 博士论坛
• 页码范围: 2038-2039
• 页数: 3页
• 分类号: R738.1
• 字数: 4020字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2003.14.030

摘要

目的构建骨肉瘤 9607细胞 cDNA表达文库,为筛选骨肉瘤特异性抗原创造条件,最终从临床角度增加患者预后质量和开辟患者康复的新途径. 方法从 9607细胞中提取 Total RNA,分离 mRNA,反转录合成双链 cDNA,末端削平,和 EcoRⅠ适配子连接,磷酸化 EcoRⅠ适配子 5'端, Sephacryl-S400柱除去小于 400 bp cDNA片段,和噬菌体λ gt11(载体)连接,包装蛋白体外包装后形成初级 cDNA文库.取适量倍比稀释后感染 E.coli Y1090,测定文库克隆数、重组率,用 PCR法测定 cDNA插入片段大小.结果建成含 1.3× 106重组子的骨肉瘤 9607细胞 cDNA表达文库,重组率 93.5%,重组子插入外源片段不小于 0.5 kb,平均长约 1.3 kb.结论达到良好文库的质量标准,适合进一步筛选目的 cDNA克隆,以开辟提高患者康复的途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马保安	解放军第四军医大学唐都医院骨科	36	217	9.0	12.0
2	张鹏	解放军第四军医大学唐都医院骨科	115	785	12.0	24.0
3	陈刚	西安交通大学第二附属医院血液内科	95	591	13.0	20.0
4	廖博	解放军第四军医大学唐都医院骨科	6	31	3.0	5.0
5	龙华	解放军第四军医大学唐都医院骨科	12	109	6.0	10.0
6	张惠中	解放军第四军医大学唐都医院骨科	6	31	2.0	5.0