法国梧桐花粉变应原cDNA表达文库的构建和初步鉴定

• 作者: 刘昀 史红阳 吴媛媛 孙秀珍 徐晶 方萍
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 法国梧桐花粉 变应原 cDNA表达文库
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 327-330
• 页数: 4页
• 分类号: Q75
• 字数: 3264字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2015.04.012

摘要

目的 构建法国梧桐花粉变应原cDNA表达文库并初步鉴定. 方法 利用Trizol法抽提法国梧桐花粉总RNA,经过Oligo(dT)纤维素柱纯化后分离mRNA,反转录合成ds cDNA,连接EcoR Ⅰ接头,末端磷酸化,Xho Ⅰ消化,电泳分离并凝胶回收大于500 bp以上的cDNA片段,与Uni-ZAP XR Vector连接,经过体外包装,感染宿主菌,构建cDNA文库,检测文库容量和重组率,并采用PCR方法对插入的cDNA片段大小进行分析. 结果 成功构建了一个文库容量为3.5×106 pfu/ml,重组率为94％,平均插入片段长度约为0.7 kb的法国梧桐花粉变应原cDNA表达文库. 结论 所建文库容量及插入片段大小合适,适用于筛选目的cDNA,为进一步研究法国梧桐花粉主要变应原基因并制备重组标准化法国梧桐花粉主要变应原疫苗奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘昀	西安交通大学医学院第二附属医院呼吸内科	60	271	9.0	12.0
2	方萍	西安交通大学医学院第二附属医院呼吸内科	37	175	8.0	11.0
3	孙秀珍	西安交通大学医学院第二附属医院呼吸内科	76	424	11.0	16.0
4	史红阳	西安交通大学医学院第二附属医院呼吸内科	26	106	6.0	8.0
5	吴媛媛	西安交通大学医学院第二附属医院呼吸内科	16	37	3.0	4.0
6	徐晶	西安交通大学医学院第二附属医院呼吸内科	9	27	2.0	4.0