重组人磷脂酰肌醇3-激酶p110β催化亚基的原核表达

• 作者: 刘文 梁念慈
• 来源期刊: 广东医科大学学报
• 关键词: 磷脂酰肌醇3-激酶 原核表达
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 18-20
• 页数: 3页
• 分类号: Q555+.7|Q784|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4057.2003.01.005

摘要

目的:表达人磷脂酰肌醇3-激酶 p110 β催化亚基.方法:将构建有人磷脂酰肌醇3 -激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI 3-K)p110 β催化亚基cDNA的重组质粒,转化大肠杆菌BL 21(DE3),用IPTG进行诱导表达.用磷脂酰肌醇-4、5-二磷酸、[γ-32P]ATP与重组PI 3-K p110 β催化亚基一起保温的方法测定PI 3-K的活性;32P标记的磷脂用氯仿和甲醇抽提、板薄层层析和放射自显影来分析.结果:SDS-PAGE显示表达出一110 kD的新蛋白质分子,重组蛋白占菌体总蛋白的比例为15%,大多数重组蛋白以可溶性形式存在.wortmannin是PI 3-K特异的抑制剂,wortmannin对重组PI 3-K p110 β亚基有抑制作用,这种抑制作用呈剂量依赖关系(2.5～20 nmo1/L).结论:重组蛋白是有活性的人PI 3-K p110 β催化亚基.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁念慈	广东医学院生物化学与分子生物学研究所	252	1946	22.0	32.0
2	刘文	广东医学院生物化学与分子生物学研究所	48	128	6.0	8.0