α-synuclein-EGFP在体外培养SH-SY5Y细胞中过表达对包涵体形成及线粒体结构改变的影响

• 作者: 张宇新 徐群渊 杨慧 珠帕尔 苏月 蔡青 赵春礼 鲁强
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: α-synuclein 绿色荧光蛋白 荧光免疫细胞化学 线粒体
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 251-256
• 页数: 6页
• 分类号: R36
• 字数: 5108字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7547.2003.03.003

摘要

为了观察α-synuclein-pEGFP真核载体在SH-SY5Y细胞内表达状况及其对细胞的影响,本研究用LipofectAMINE法转染SH-SY5Y细胞,用荧光显微镜检测报告基因表达产物EGFP,用荧光免疫细胞化学法检测α-synuclein蛋白表达以及用H E染色、光学显微镜观察转基因表达产物在细胞内的积聚,电镜观察转基因细胞超微结构形态学变化,rhodamine 123染色、荧光显微镜检测线粒体跨膜电位变化.结果证明,该载体转染SH-SY5Y细胞后,在细胞内同时表达报告基因和目的基因;外源基因的表达产物可在细胞内积聚形成包涵体并引起线粒体结构和功能改变.本研究结果提示,本实验获得的细胞模型可模拟Parkinson病发生过程中一些基本的神经病理学特点,可为进一步探讨Parkinson病患者多巴胺能神经元变性缺失机制提供依据.