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摘要:
建立相对简单经济的检测HLA-A*0201等位基因的方法,以便于从特定人群中快速筛选HLA-A*0201阳性的个体,满足科研的需要.根据第十二届HLA国际联合会提供的标准操作规程和一对HLA-A位点特异性的引物,从外周血中提取基因组DNA,扩增HLA-A基因;再设计两对HLA-A2组特异性引物,采用套式PCR分别扩增HLA-A基因的5'端和3'端,如出现特异条带,则将后两对引物的PCR产物进行测序分析,对照HLA-A2组等位基因的第2和第3外显子序列图,确定是否为HLA-A*02011~02016的6个等位基因.结果:以HLA-A*0201阳性的T2细胞株为阳性对照进行检测,结果完全正确,并设立非HLA-A*0201的A2细胞株RML(HLA-A*0204)及Raii细胞株(非A2组)为对照,同时随机检测30份门诊病人血样,其中7份为HLA-A2阳性,经测序,2例为HLA-A*02011,1例为HLA-A*0211或0235,1例是HLA-A*0206或0221或0241或0244或0251或0254,1例是HLA-A*0205或0214,1例是HLA-A*0234或0235,1例是0250.本方法利用位点特异性引物进行2~3次PCR扩增,结合PCR产物测序便可相对简便经济地检测出HLA-A*0201的全部6个亚等位基因,为快速检测其他特定HLA等位基因提供了经济实用的模式.
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文献信息
篇名 PCR-SSP结合测序分析快速筛选HLA-A*0201亚等位基因
来源期刊 上海免疫学杂志 学科 医学
关键词 HLA分型 PCR-SSP 测序
年,卷(期) 2003,(4) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 240-243
页数 4页 分类号 R392.4
字数 2691字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1001-2478.2003.04.007
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研究主题发展历程
节点文献
HLA分型
PCR-SSP
测序
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
现代免疫学
双月刊
1001-2478
31-1899/R
大16开
上海市重庆南路280号5号楼1103室
1981
chi
出版文献量(篇)
2528
总下载数(次)
13
总被引数(次)
12395
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
教育部留学回国人员科研启动基金
英文译名:the Scientific Research Foundation for the Returned Overseas Chinese Scholars, State Education Ministry
官方网址:http://www.csc.edu.cn/gb/
项目类型:
学科类型:
论文1v1指导