三种荧光标记法对寡核苷酸芯片杂交信号的影响

• 作者: 周文明 张学军 曹慧敏 赵建龙
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 寡核苷酸 杂交 生物标记
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 432-434
• 页数: 3页
• 分类号: R394-33
• 字数: 2109字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2003.06.007

摘要

目的观察标记引物法、随机渗入标记法、末端转移标记法三种荧光标记法对寡核苷酸芯片杂交信号的影响.方法将淋球菌gyrA基因91位密码子突变型探针倍比稀释成终浓度为1 000 μmol/L～0.25 μmol/L的梯度浓度点样并制作寡核苷酸芯片,PCR扩增荧光标记包含gyrA基因突变的目的DNA片段,与芯片杂交,分别记录三种标记方法的杂交信号强度.结果标记引物法的荧光信号最强,随机渗入标记法的荧光信号强度次之,其Cy5-dUTP最佳浓度为0.1 mmol/L(dTTP:Cy5-dUTP=10∶1),末端转移标记法反应时间在60 min和120 min时荧光信号值相近.点样的探针浓度达到31μmol/L以上,荧光信号为平台期.结论明确了三种荧光标记法对寡核苷酸芯片杂交信号的影响,有助于选择寡核苷酸芯片的荧光标记方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵建龙	中国科学院上海微系统与信息技术研究所	140	1166	18.0	26.0
2	曹慧敏	中国科学院上海微系统与信息技术研究所	12	66	5.0	7.0