猪带绦虫六钩蚴cDNA文库的构建与筛选

• 作者: 唐雨德 陆承平
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪带绦虫 六钩蚴 cDNA文库 筛选
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 567-569
• 页数: 3页
• 分类号: S852.7|Q78
• 字数: 3701字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4545.2003.06.017

摘要

在体外将猪带绦虫虫卵孵化为有活力的六钩蚴.采用商品化试剂盒抽提六钩蚴总RNA、mRNA,反转录为双链cDNA,再加EcoR I Adapter.在去除小片段后,dscDNA与λgt11噬菌体DNA连接,经蛋白包装,构建了猪带绦虫六钩蚴λgt11 cDNA文库.该文库效价为3.5×10 9pfu/mL,重组DNA片段大小为0.5～3.2kb,平均为1.6kb,蓝白斑比1:9.用抗体探针对文库进行免疫学筛选,在消除非特异性反应的基础上筛选约106重组子,共得到118株强阳性克隆;应用PCR鉴定上述部分阳性克隆,均扩增到0.5kb以上的片段.结果显示,构建的文库合格,含六钩蚴所有抗原基因,可用于六钩蚴cDNA克隆的筛选;用免疫学与PCR联合筛选cDNA文库,可消除假阳性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆承平	南京农业大学动物医学院	387	5495	37.0	51.0
2	唐雨德		53	306	10.0	14.0