绵羊生长激素(oGH)的分子克隆与序列测定

• 作者: 刘守仁 杨华 沈敏 王新华 薄新文 连宏军 钟发刚
• 来源期刊: 中国兽药杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊 脑垂体 生长激素 基因克隆
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告·检测技术
• 页码范围: 8-10
• 页数: 3页
• 分类号: S859.793
• 字数: 1701字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-1280.2003.06.005

摘要

本文旨在新疆绵羊生长激素(oGH)基因的克隆.从阿勒泰×中国美利奴杂交羊脑垂体细胞中提取总RNA,分离得到具翻译活性的mRNA.用RT-PCR方法扩增出编码oGH的基因,长度为671 bp.将扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,回收纯化.采用PCR克隆试剂盒将扩增产物连接至pT-Adv质粒上,经Pst I和Xba I双酶切鉴定正反插入后,筛选正向插入阳性克隆,并进行序列分析.结果表明克隆到的oGH基因序列与国外报道的序列有4个碱基差异,但所推导的氨基酸序列完全一致.oGH基因的开放阅读框架共含654个核苷酸,编码217个氨基酸,其中信号肽26个氨基酸,编码碱基为1～78(78 bp);成熟肽191个氨基酸,编码碱基为79～651(573 bp);终止密码子TAG(652～654 bp).其蛋白质的氨基酸序列与牛、人和鱼的序列同源性分别为99.08%、26.7%和5.9%.