人骨肉瘤细胞株中骨形态发生蛋白-1的检测、克隆和表达

• 作者: 丘钜世 刘超 朱全胜 陈冬瑛
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨形态发生蛋白类 基因 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 751-756
• 页数: 6页
• 分类号: R363
• 字数: 5162字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2003.06.009

摘要

目的:利用基因工程技术生产人骨形态发生蛋白-1的高保守区多肽,为进一步产生广谱型BMP-1抗体提供有效的抗原蛋白.方法:通过分析BMP-1类各种分子的基因序列及蛋白结构,选择其中的一个片段作为目的基因.从人骨肉瘤细胞株Saos-2中提取总RNA, 用RT-PCR扩增目的基因片段并克隆到原核表达载体pMAL c2中, 构建成重组质粒BMP-1(322-588aa)-pMAL c2.将该重组质粒转化大肠杆菌DH5-α, 经过筛选鉴定获得数个阳性克隆,再进行DNA序列测定.最后用IPTG诱导宿主菌表达融合蛋白.结果:BMP-1基因片段被成功地克隆到pMALc2载体中,在IPTG的诱导下能高效表达,融合蛋白的表达量占细菌蛋白总量的(66-72)%. 结论:所获得的重组蛋白包含BMP-1的几个完整的重要结构域(2个CUB区和1个EGF区),为BMP-1类分子所共有的高度保守区.该重组蛋白作为抗原,可进一步用于产生能有效、特异地识别人类BMP-1类分子的广谱型BMP-1抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱全胜	中山大学中山医学院病理学教研室	9	9	2.0	2.0
2	丘钜世	中山大学中山医学院病理学教研室	20	149	6.0	11.0
3	陈冬瑛	中山大学中山医学院病理学教研室	3	7	2.0	2.0