改良的降落PCR与普通PCR结果比较

• 作者: 张贵星 薛乐勋 袁保梅 许培荣
• 来源期刊: 郑州大学学报(医学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 改良降落PCR pfu DNA聚合酶 PCR特异性
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 352-354
• 页数: 3页
• 分类号: Q781
• 字数: 1681字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2003.03.013

摘要

目的:设计并验证一改良的降落PCR(MTD-PCR)程序.方法:自盐藻bardawil中提取基因组DNA作为PCR模板,使用Taq DNA聚合酶及pfu DNA聚合酶,运用普通PCR和MTD-PCR程序,扩增胡萝卜素生物合成相关基因(cbr)上游启动子序列,并电泳比较PCR扩增产物的特异性.结果:使用普通Taq酶进行PCR,普通PCR程序产生200 bp,500 bp和1 272 bp 的3条带, 而MTD-PCR程序仅克隆出1 272 bp的特异带;利用高保真的pfu DNA聚合酶作PCR,在MTD-PCR泳道中也仅有1 272 bp 1条带,而普通PCR除了产生1 272 bp的特异带外,还出现1条500 bp的非特异带.结论:无论使用普通Taq酶或高保真酶pfu,改良的MT-PCR程序均明显提高PCR的特异性,提示它可用于克隆普通PCR难以克隆的基因片段,或在假阳性难以去除的情况下提高PCR的特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张贵星	郑州大学基础医学院生物工程实验室	36	217	7.0	14.0
2	薛乐勋	郑州大学基础医学院生物工程实验室	140	1187	18.0	26.0
3	许培荣	郑州大学基础医学院生物工程实验室	40	265	11.0	15.0
4	袁保梅	郑州大学基础医学院生物工程实验室	30	211	8.0	13.0