靶向核糖核酸酶在体外抑制乙型肝炎病毒复制的研究

• 作者: 丁劲 刘军 宫卫东 李英辉 薛采芳 赵亚
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 靶向核糖核酸酶 转染
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 免疫治疗
• 页码范围: 484-488
• 页数: 5页
• 分类号: R511
• 字数: 4433字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2003.06.025

摘要

目的观察HBV靶向核糖核酸酶(targeted ribonuclease,TR)的体外抗病毒作用. 方法将包含HBV核心蛋白(HBVc)和人类嗜酸性粒细胞来源的神经毒素(hEDN)编码基因克隆入pcDNA3.1(-),构建HBV TR重组真核表达载体p/TR.构建包含HBV核心蛋白、人类嗜酸性粒细胞来源的神经毒素以及突变失活的HBV TR编码基因的重组真核表达载体p/HBVc、p/hEDN、p/TRmut (hEDN的Lys113→Arg,失去其RNase活性)作为对照.脂质体转染p/TR、p/HBVc、p/hEDN、p/Trmut、pcDNA3.1(-)进入2.2.15细胞.转染后,RT-PCR证实转染基因的表达,通过观察转染细胞的形态核MTT法检测转基因表达的细胞毒性.用固相放免法测定转染细胞培养上清HBsAg浓度. 结果转基因在2.2.15细胞内都有表达,且对细胞无毒性.与空转染组相比,pcDNA3.1(-)/TR转染组HBsAg含量下降58%;对照各质粒无此变化. 结论 TR在体外可以抑制HBV复制,同时对宿主细胞无毒性.TR可以作为一种新型的抗病毒制剂治疗乙肝病毒感染.