截断型人可溶性CD40L的表达与纯化

• 作者: 孔祥平 孟凌华 易学瑞 李斌 杨联萍 袁有成 邵光
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CD40L 包涵体 亲和层析 SP2/O细胞
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 365-368
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 2538字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2004.06.009

摘要

目的表达相对分子质量18 000的截断型人可溶性CD40L.方法针对人CD40L(Glu108-Leu261)设计引物,以全长人CD40L为模板,扩增目的基因,经pGEM-T中间载体进一步连接到pQE-40载体,构建pQE/sCD40L表达载体.转化E.coliM15后经IPTG诱导表达,分离、洗涤包涵体,并利用Ni-NTA亲和层析纯化目的蛋白,经复性后检测对骨髓瘤细胞SP2/0细胞株的抑制作用.结果克隆的目的基因为480bp,经测序与文献报道一致,所构建的菌株(M15/PQE/sCD40L)经诱导表达目的蛋白量为26.7%,相对分子质量为18 000,纯化后蛋白纯度为96.5%,对SP2/0细胞有生长抑制作用.结论原核表达的截断型人可溶性CD40L具有抑制肿瘤细胞生长作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李斌	华南农业大学食品学院	62	350	11.0	16.0
2	孔祥平	解放军第四五八医院全军传染病中心	46	182	7.0	11.0
3	易学瑞	解放军第四五八医院全军传染病中心	18	70	4.0	8.0
4	袁有成	解放军第四五八医院全军传染病中心	11	56	4.0	7.0
5	杨联萍	解放军第四五八医院全军传染病中心	8	29	3.0	5.0
6	孟凌华	华南农业大学食品学院	3	98	2.0	3.0
7	邵光	中山大学第二临床医学院消化内科	7	23	2.0	4.0