重组毕赤酵母菌高密度表达人源抗-HBs Fab抗体的研究

• 作者: 余宙耀 粟宽源 邓宁 陈文吟 饶桂荣
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 抗-HBs Fab抗体 高密度发酵 毕赤酵母菌 亲和层析
• 年，卷（期）: 2004,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 810-812
• 页数: 3页
• 分类号: R512.62
• 字数: 2884字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2004.09.024

摘要

目的探讨抗-HBs Fab抗体发酵工程菌GS115/Fab的高密度发酵及对发酵产物的纯化与活性鉴定方法.方法采用补料分批培养方法,在5L发酵罐中对发酵工程菌GS115/Fab进行高密度发酵,发酵温度28～30℃,pH值范围为5.0～5.5,溶氧范围20%以上;3次发酵分别于OD600值达到400～450、200～250、300～350时开始诱导,甲醇诱导浓度为0.5%～1%,经96h左右的诱导后终止发酵,对发酵上清进行亲和纯化,并通过ELISA法对纯化产物进行活性鉴定.结果在OD600为300～350时开始诱导有利于发酵过程条件的控制和目的蛋白的表达,目的蛋白表达量为245mg/L.发酵上清通过亲和层析纯化,获得纯度为98%的重组Fab抗体,该抗体经ELISA分析具有较高的HBsAg抗原亲和力及特异性.结论 Fab酵母菌工程菌在5L发酵罐高密度发酵成功,为抗-HBs Fab抗体的产业化生产及临床研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邓宁	中山大学生命科学学院	2	5	1.0	2.0