热休克预处理抑制过氧化氢所致C2C12肌原细胞释放天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶激活物及细胞凋亡

• 作者: 刘梅冬 唐道林 石永忠 肖卫民 肖献忠 蒋碧梅
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 病理学与病理生理学 肌原细胞内源性保护机制 热休克预处理 热休克蛋白 凋亡,肌原细胞 第二种线粒体 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶激活物 过氧化氢
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 125-130
• 页数: 6页
• 分类号: R36
• 字数: 4589字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3949.2004.02.001

摘要

为探讨热休克预处理对过氧化氢所致C2C12肌原细胞凋亡和第二种线粒体释放的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶激活物从线粒体释放的影响,采用0.5 mmol/L过氧化氢作用于C2C12肌原细胞.Hoechst33258荧光染色,观察细胞形态学改变并计算凋亡百分率,抽提DNA作琼脂糖电泳,以确定细胞凋亡情况.采用天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶活性定量检测试剂盒及蛋白质印迹观察天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3,天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶9的活化情况.采用免疫荧光及细胞成分分离后蛋白质印迹检测第二种线粒体释放的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶激活物从线粒体的释放.结果发现,过氧化氢处理1～2 h,第二种线粒体释放的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶激活物逐渐从线粒体释放入胞浆;处理4 h天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3,天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶9活性升高,12 h达高峰;处理24 h细胞明显出现凋亡,凋亡百分率明显升高.热休克预处理可诱导C2C12肌原细胞中热休克蛋白90,热休克蛋白70及αB-晶状体蛋白的表达增高;抑制第二种线粒体释放的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶激活物释放、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3,天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶9的活化及细胞凋亡的发生.结果提示,线粒体信号通路在过氧化氢所致的心肌细胞凋亡中发挥重要作用;热休克预处理通过抑制上述通路而减轻过氧化氢所致的细胞凋亡,其机制与其诱导热休克蛋白表达、阻断第二种线粒体释放的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶激活物从线粒体向胞浆释放、从而抑制天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3,天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶9的活化有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘梅冬	中南大学湘雅医学院病理生理学教研室	30	196	9.0	12.0
2	肖献忠	中南大学湘雅医学院病理生理学教研室	130	772	14.0	18.0
3	石永忠	中南大学湘雅医学院病理生理学教研室	14	125	8.0	11.0
4	唐道林	中南大学湘雅医学院病理生理学教研室	19	226	9.0	14.0
5	肖卫民	中南大学湘雅医学院病理生理学教研室	20	210	9.0	13.0
6	蒋碧梅	中南大学湘雅医学院病理生理学教研室	39	203	9.0	11.0