HFRS患者汉滩病毒核蛋白特异性T细胞克隆及其靶细胞的建立

• 作者: 张颖 王平忠 白雪帆 黄长形
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肾综合征出血热 汉滩病毒 核衣壳蛋白 T细胞克隆
• 年，卷（期）: 2004,（8）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 600-605
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 6309字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2004.08.003

摘要

目的建立肾综合征出血热(HFRS)患者汉滩病毒(HTNV)核衣壳蛋白(NP)特异性CTL克隆,为HTNV NP T细胞表位鉴定及HFRS患者T细胞免疫功能研究奠定基础.方法采用Ficoll密度梯度离心法分离HFRS患者外周血单个核细胞(PBMC),用灭活HTNV和IL-2体外刺激,有限稀释法建立T细胞克隆,流式细胞术鉴定克隆表型.并用EB病毒(EBV)转化B淋巴细胞,建立B淋巴母细胞样细胞系(B-LCL),以含HTNV S 基因的重组痘苗病毒感染B-LCL作靶细胞,以CTL 克隆作效应细胞进行细胞毒杀伤试验,测定T细胞克隆的抗原特异性.结果 T细胞克隆能特异性识别表达NP的B-LCL.在5名患者中,3名有较高的杀伤率,并自2名患者建立了5株HTNV特异性CTL克隆,其表型为CD8+均大于60%.结论成功建立了HFRS患者HTNV NP特异性CTL克隆及其靶细胞.NP是HFRS患者HTNV特异性CTL应答的主要靶抗原之一.