Ad-BMP-2促进兔骨髓间质干细胞成骨转化的研究

• 作者: 刘建宇 刘枫晨 吉光荣 林欣 王岩松 王立春 石义刚 韩剑峰
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 基因转染 骨髓 间质干细胞 骨形态发生蛋白-2
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 20-24
• 页数: 5页
• 分类号: R318.5
• 字数: 3540字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2004.01.005

摘要

探讨用携带有人BMP-2基因片段的复制缺陷重组腺病毒(Ad-BMP-2)转染对体外培养MSCs成骨转化的影响.取日本大耳白兔20只自双侧股骨大转子取材培养MSCs,左侧来源细胞为实验组,右侧为对照组.以复制缺陷重组腺病毒介导人BMP-2基因转染MSCs后用RT-PCR法及免疫组化染色证实转基因MSCs的BMP-2蛋白表达情况,通过改良Gomori钙钴法及ALP检测试剂盒检测两组细胞的ALP活性;通过RT-PCR及Western blot检测两组细胞Ⅰ型胶原的表达;通过BGP放免分析试剂盒检测两组细胞的OCN含量;并通过透射电镜观察转基因前后MSCs超微结构的变化.实验证实用Ad-BMP-2转染的MSCs具有成骨细胞的结构特征和生物学特性.定量分析显示转基因组MSCs培养上清中ALP活性为(7.01±0.59)U/L,对照组为(5.23±0.55)U/L.Ⅰ型胶原表达的半定量分析显示转基因组为1.35±0.12,对照组为3.65±0.37.OCN含量在转基因组为(24.50±0.93)μg/L,对照组为(15.45±1.81)μg/L.认为Ad-BMP-2转染可以提高MSCs的体外成骨能力.