重组人可溶性B淋巴细胞激活因子的制备及活性分析

• 作者: 何凤田 吉清 张艳 李蓉芬 钟小林 陈麟凤 高会广
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: TNF家族的B细胞激活因子(BAFF) cDNA克隆 原核表达 淋巴细胞活化
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 274-278
• 页数: 5页
• 分类号: R730.3
• 字数: 4122字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2004.05.004

摘要

目的制备具有功能活性的人TNF家族的B细胞激活因子(B cell activating factortothe TNF family,BAFF)胞外区134～285氨基酸残基段,为BAFF的深入研究创造条件.方法提取人新鲜扁桃体组织总RNA,经RT-PCR扩增编码人BAFF胞外区134～285氨基酸残基cDNA,经序列测定后,构建于原核表达载体pQE-80L并转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导表达及Ni2+-NTA柱层析纯化目的蛋白,行SDS-PAGE和Western印迹检测.最后经MTT法检测其增殖活性.结果RT-PCR扩增得到了459 bp的cDNA片段,序列分析与GenBank中报道的编码人BAFF134-285的cDNA序列一致,SDS-PAGE及Western印迹证实表达蛋白确实为6×His-BAFF134-285融合蛋白并存在于包涵体中.活性检测证实其能明显刺激肿瘤细胞的增殖.结论利用大肠杆菌可高效表达rhBAFF134-285,得到的纯化蛋白具有较高的生物学活性,为进一步的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何凤田	第三军医大学生物化学与分子生物学教研室	127	592	12.0	15.0
2	张艳	第三军医大学生物化学与分子生物学教研室	63	408	11.0	17.0
3	李蓉芬	第三军医大学生物化学与分子生物学教研室	38	166	7.0	11.0
4	钟小林	第三军医大学生物化学与分子生物学教研室	26	112	6.0	9.0
5	高会广	第三军医大学生物化学与分子生物学教研室	15	84	4.0	9.0
6	陈麟凤	第三军医大学生物化学与分子生物学教研室	2	0	0.0	0.0